Dış Kaynaklı Proje Süreçleri Yönetim Sistemi
Cömert kılıç S. (Yürütücü), Tezcaner A., Özdal M. , Ceylan O. , Demirtaş R. , Aysin F.
Proje Özeti
Önerilen projede, çalkalamalı kültür şartlarında ve dağınık formda üretilen küresel şekilli bakteriyel selülozun (KBS) yapısal özellikleri geliştirilmesi, asetik asit ile işlem görmüş KBS’lerin ayrı ayrı borik asit (BA), hidroksiapatit (HA) ve trombositten zengin plazma (PRP) emdirilmesi, üretilen KBS’lerin in-vitro karakterize edilmesi ve biyoaktif yüklü KBS’lerin partiküler hale getirilmiş otojen kemik greft materyali ile karıştırılarak in vivo koşullarda kemik rejenerasyonunda kullanılma potansiyelinin değerlendirilmesi amaçlanmaktadır. Literatürde sert doku rejenerasyonu amacıyla BA, PRP veya HA’nın yüklendiği KBS’nin tek başına veya herhangi bir greft materyaliyle karıştırılarak kemik defektlerinde kullanılarak etkinliklerinin değerlendirildiği hiçbir çalışma bulunmamaktadır. Projede ilk aşama olarak asetik asit ile işlem görmüş KBS’lerin yapısal özelliklerinin karakterize edilerek optimal özellikli KBS örneklerinin üretilmesi, BA, HA ve PRP yüklenmesi ve salım çalışmaları yapılması planlanmaktadır. İkinci aşamada ise osteoblast hücre hattı kullanılarak optimal özellikli KBS ve ayrı ayrı BA, HA ve PRP emdirilmiş KBS örneklerinin biyouyumluluk özellikleri in-vitro hücre kültürü çalışmalarıyla incelenmesi planlanmaktadır. Üçüncü ve son aşama olarak, optimal özellikli KBS ve ayrı ayrı BA, HA ve PRP emdirilmiş KBS örneklerinin tek başlarına ve partiküler hale getirilmiş otojen kemik greft materyali ile karıştırılarak tavşanlarda oluşturulan kalvarial defektlerinde kullanımı ile kemik rejenerasyonu üzerindeki etkinliklerinin in-vivo olarak hem radyolojik hem de histolojik, histomorfometrik ve immünohistokimyasal analizlerle değerlendirilmesi hedeflenmektedir Asetik asitle işlem gören KBS ve ayrı ayrı BA, HA ve PRP emdirilmiş KBS örneklerinin karakteristik özellikleri SEM, FTIR, XRD analizleri ve gözeneklik ve N2 adzorpsiyon-dezorpsiyon testleri, bozunma, su tutma ve şişme, bioaktif madde hapsetme verimi ve ilaç salım analizleri ile değerlendirilecek ve optimal özellikli KBS örnekleri üretilecektir. Optimal özellikli KBS ve ayrı ayrı BA, HA ve PRP emdirilmiş KBS örneklerine fare osteoblast öncü hücre hattı (MC3T3-E1) ekimi yapılacak ve sitotoksisite testlerine ilaveten, osteoblastik hücrelerin yapışma, çoğalma, farklılaşma, mineralizasyon özellikleri ve hücre morfolojisi değerlendirilerek in-vitro biyo-uyumlulukları incelenecektir. İn-vivo çalışma dizaynında ise, optimal özellikli KBS ve ayrı ayrı BA, HA ve PRP emdirilmiş KBS örneklerinin tek başlarına ve partiküler hale getirilmiş otojen kemik greft materyali ile karıştırılarak 48 adet Yeni Zelanda Albino tavşanın herbirinde oluşturulan kalvarial kemik defektlerinde kemik rejenerasyonu amacıyla uygulanacak ve elde edilen örnekler 6. ve 12. Haftada radyolojik (micro CT) ve histolojik, histomorfometrik ve immünohistokimyasal olarak değerlendirilecektir. Elde edilecek veriler dağılım durumuna göre, One way Anova /Two-way Anova veya Kruskal Walis testleri ile analiz edilecektir. Bu projenin tamamlanması sonucunda bioaktif madde yükleme özellikleri ve rezorbsiyon hızları geliştirilmiş, aynı zamanda daha etkin ve uzun süre salım özelliği taşıyan optimal özellikli KBS örneklerinin geliştirilmesi sağlanacaktır.